آنزیم DNA پلی مراز Taq

Taq DNA Polymerase  که با روش کروماتوگرافی خالص سازی شده با یک بافر 10x بهینه و محلول MgCl2 25 mM همراه است.

این بافر این بافر 10X   اختصاصی برای بهبود Sub-optimal PCR ناشی از تمپلتها، درجه بالای ساختار ثانویه نواحی غنی از GC ارائه می شود. آنزیم Taq DNA Polymerase  پارس توس با این ویژگی ها قادر است یک باند خاص به شما ارائه دهد.

درخصوص تاریخچه Taq DNA Polymerase میتوان چنین عنوان کرد که تک پلیمراز یک دی‌ان‌ای پلیمراز مقاوم به حرارت است که اولین بار در سال ۱۹۷۶ توسط Chien  و همکارانش از یک باکتری گرمادوست بنام Thermus aquaticus استخراج شد. این آنزیم به وفور در PCR مورد استفاده قرار می‌گیرد.

این باکتری که از چشمه‌های آب گرم استخراج شده‌است، دارای آنزیم تگ پلیمراز است. این آنزیم توانایی تحمل دمای بالا را دارد و به همین دلیل در تکنیک PCR کاربرد فراوانی یافته‌است؛ بنابراین به جای آنزیم دی ان ای پلیمراز که از باکتری E.Coli استخراج می‌شد و در گذشته در فرایند PCR مورد استفاده قرار می‌گرفت، از این آنزیم استفاده می‌شود.

دمای بهینه برای فعالیت آنزیم تگ پلیمراز، ۷۵ تا ۸۰ درجه سانتیگراد است. همچنین دارای نیمه عمر ۲ ساعت در ۹۲/۵ درجه سانتیگراد، ۴۰ دقیقه در ۹۵ درجه سانتیگراد و ۹ دقیقه در ۹۷/۵ درجه سانتیگراد می‌باشد. این آنزیم در دمای ۷۲ درجه سانتیگراد قادر است ۱۰۰۰ جفت باز را در کمتر از ۱۰ ثانیه رونویسی کند.

یکی از نقاط ضعف این آنزیم عدم توانایی آن برای فعالیت تحصیح Exonuclease Proofreading در جهت ’۳ به ’۵ است. به‌طور کلی در هر ۹۰۰۰ نوکلئوتید، ۱ اشتباه رخ می‌دهد.

ویژگیهای آنزیم DNA پلی مراز Taq

• خلوص بسیار بالا با کروماتوگرافی.
• مناسب برای PCR شبیه سازی و TA Cloning PCR.